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並要求北洋政府“絕對保密，儘速答覆”。
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二十一條要求嚴重損害了中國的主權，方世開不敢立即表示接受。訊息一經傳開，反日輿論沸騰。歐米列強對日本損害他們在華的侵略權益一致不滿，紛紛給予抨擊。
正式談判於一九一五年二月二日開始。日本以支援方世開稱帝引誘於前，以武力威脅於後，企圖使方世開政府全盤接受。中國人民反日愛國鬥爭日趨高漲，日本見事態嚴重，便一面宣佈第五項為希望條件，屬於勸告性質；一面提出新案，內容與原要求一至四項基本相同，僅將若干條文改用換文方式。
三十五年五月四日，日本為迫使中國接受“二十一條”，召開內閣會議及元老大臣會議，決定對華髮出最後通牒。五月七日，日使日至益發出最後通牒，宣稱除第5號各項允許以後再行協商外，限四十八小時完全應允，否則“將執認為必要之手段”。與此同時，日本政府頒佈在命令山東和新羅日軍備戰。日商紛紛回國，日艦隊遊弋於渤海，進行武力威脅。
各國對日本對華舉措迅速作出反應。路、法兩國雖然猜忌日本，卻因歐戰無暇顧及。特別是路斯帝國，因為日本的這一舉措將極大地損害它在華的利益。五月七日晚，方政府外交部派員前往路斯帝國使館尋求支援，俄公使使各路本斯基要中國政府“立即無條件地接受日本的最後通牒”。
八日上午，英吉利帝國公使祝本汀到外交部知會外交次長陸正洋，說：“目前中國情形至為危險，各國不暇東顧，為目前計，只有忍辱負重，接受要求”，“不宜作武力之爭”，並要陸轉告方世開。
方世開此時正在加緊稱帝的活動，原本指望歐米列強幹涉的希望落空，又怕得罪日本人，反倒自己的皇帝做不成，便以中國無力抵禦外侮為理由，於五月九日遞交覆文表示除第五項各條容日後協商外，全部接受日本的要求。五月二十五日在北京簽訂了所謂“中日條約”和“換文”。
《二十一條》簽定後，舉國譁然，招致全中國人民的反對，一時間國內反方的各派勢力紛紛舉行各種遊行集會，公開聲討方世開的賣國行徑。方世開只得親自出面，澄清自己並沒有簽定所謂喪權辱國的《二十一條》，由於這是一個秘密協定，日本方面並未表態，這場風波也總算得以平息下來。
三十八年一次大戰結束，同盟國戰敗。中華三十八年一月十八日，戰勝國在巴黎召開“和平會議”。巴黎和會在帝國主義列強操縱下，不但拒絕中國的要求，而且在對德和約上，明文規定把德國在山東的特權，全部轉讓給日本。由於方世開與日本之間的秘密協定，北京政府竟準備在“和約”上簽字，從而激起了中國人民的強烈反對。
五月一日，北京大學的一些學生獲悉北洋政府準備在“巴黎和約”上簽字的訊息。當天，學生代表就在北大西齋飯廳召開緊急會議，決定五月三日在北大法科大禮堂舉行全體學生臨時大會。五月四日，北京三所高校的三千多名學生代表衝破軍警阻撓，雲集天安門，他們打出「還我青島」、「收回山東權利」、「拒絕在巴黎和會上簽字」、「廢除二十一條」、「抵制日貨」、「寧肯玉碎，勿為瓦全」等口號，並且要求懲辦交通總長曹如林等賣國賊，學生遊行隊伍移至曹宅，痛打了親日派賣國賊章宗祥，併火燒曹宅。隨後，軍警給予鎮壓，並逮捕了學生代表32人。
此次軍警鎮壓學生抗議活動引起更大規模的抗議示威，到了六月，被關押的學生已達近一千人，這更激起全國聲勢浩大的聲援活動，各城市開始罷課、罷工、罷市，聲援北京學生的愛國運動。被監禁的學生獲釋。各地學生團體和社會知名人士紛紛通電，抗議北洋政府的這一暴行。面對強大的社會壓力，方世開政府只得將曹、陸、章等親日派漢奸相
