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3、試管苗種質儲存方法

儲存試管苗種質關鍵是要維持最低的生長速度,生長速度取決於培養溫度、培養基組成和品種特性.

(1) 增加培養基滲透壓

(2)降低儲存溫度:溫度是試管苗儲存的關鍵因素,在低溫(3~5℃)條件下,試管苗中各種酶活性降低,因而減緩了代謝過程和生長速度。如果增加培養基滲透壓與降低溫度相結合,試管苗繼代培養間隔時間為2~3年

(3)利用植物生長抑制

(4)補充光照

目前,作為儲存種質資源的細胞或組織培養物有:愈傷組織、懸浮細胞、幼芽生長點、花葯、花粉、體細胞、原生質體、幼胚等。

從植物中抽取大分子量DNA,用限制性核酸內切酶把所抽取的DNA切成許多片段,再透過一系列的複雜步驟,把這些DNA連線在載體上,透過載體將DNA片段轉移到大腸桿菌中去,透過大腸桿菌的無性繁殖,產生大量單複製的基因,當需要某個基因時,就可透過某種方法去“鉤取”獲得。

2、植物DNA庫的儲存物件與運作

(1)儲存物件:種子植物和非種子植物的種質資源均可採用DNA庫儲存。

種子植物主要儲存以下幾類基因材料:a.難於蒐集到的材料,b 雖然蒐集到種子,但難以繁殖更新的材料,c.不能檢測種子活力的材料,d.頑拗型種子植物,e.珍稀瀕危植物,f.核心樣品材料,g.基因工程的中間材料。

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非種子植物主要包括藻類、苔蘚類和蕨類等,這些植物絕大部分處於野生狀態,而且包含著十分豐富的遺傳多樣性,急需得到保護。

(2)植物DNA庫的運作:第一步:制定計劃,進行植物樣本的採集,並製作蠟葉標本,記錄原始標記。第二步:妥善儲存所蒐集的材料,根據需要和條件提取並儲存基因組DNA,克隆重要的基因,建立DNA或cDNA庫。第三步:根據使用者的需要,在使用者提供引物的基礎上,鉤取基因,並用PCR擴增DNA,發放給使用者。

,(2)分組:將具有相似性狀的樣品歸為一類, 逐級分類,沒有資料的樣品單獨分組。

(3)選擇:即確定每組選擇的數量和物件

(4)建立核心樣本(庫):對選擇出來的核心樣品進行鑑定,確保它們是來自不同組的代表,繁殖核心樣品,建立該種作物核心種質庫。

建成的核心種質庫需不斷完善、更新

4、發展核心種質應注意的幾個問題

(1)核心種質不能替代整個種質蒐集品。

(2)核心種質的構建需要多學科的交叉知識。

(3)核心種質的構建還沒有一套成型的理論。

5、核心種質構建的現狀:

目前全球已對50多種作物進行了相關研究,其中野生大豆、花生、苜蓿等30多種植物已經或正在建立核心種質 。我國對大豆、栽培稻立項

生物學特性的鑑定方法主要分兩種

1、自然環境鑑定

二、生物學特性鑑定

1、自然環境鑑定

(1)區域鑑定 :利用不同地區的地理條件、土壤條件以及溫度、光照、雨量等氣候因素的差異,栽培植物種質材料,觀察其生育狀況,以鑑別種質材料在不同地區的適應性,以及不同品種、變種和種間生物學特性的差別。

(2)季節鑑定:鑑定種質材料對季節的適應性。如分春秋兩季栽培,鑑定種質對不同季節的適應性。

同一種作物,有的品種適宜春季栽培,有的適宜秋季栽培。

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