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第2部為細菌實驗部，設在平房鎮，部長依次由早川工{{敏、大田澄、村上隆、碇常重擔任。其任務是從事實施細菌戰及實施方法的研究，即攻擊方法、製造細菌彈、繁殖毒化昆蟲等的研究。該部主要使用動物和活人進行細菌試驗，其中&ldo;田中班&rdo;由731部隊設立以後一直在該部隊工作的田中英雄負責，主要任務是培養跳蚤。&ldo;八木澤班&rdo;從事植物病毒研究和傳染試驗，在正黃旗三屯西南城子溝設立了臨時實驗場，在安達鎮東35華裡{{{{的鞠家窯附近設定了特別實驗靶場，還有為細菌實驗服務的&ldo;動物班&rdo;、&ldo;航空班&rdo;、&ldo;無線電班&rdo;和&ldo;氣象班&rdo;。
第3部為防疫給水部，部長依次是由今江一夫、江口豐潔、增田知貞擔任。該部宣化班設在哈爾濱市內，是在原&ldo;加茂部隊&rdo;舊址上重新組建的。它下轄濾水器製造廠和細菌瓷彈殼製造廠（位於楊馬架子）。在製造濾水器的幌子掩護下，秘密生產&ldo;石井式&rdo;陶製細菌彈殼。同時，還在731部隊本部所在地平房鎮設定了各類小型細菌武器的研製、生產場所。此外，為整個731部隊服務的&ldo;運輸班&rdo;也歸該部領導。
第4部為細菌生產部，部長依次為川島清少將、大田澄大佐。該部下設兩個分部，按照各自的分工獨立製造各類細菌。從細菌繁殖到細菌武器裝配的全套工序由柄澤班、野口班、有田班、三谷班、小瀧班和植村班完成。
總務部設在平房鎮，部長初期由中留金藏中佐擔任，後期由太田澄大佐兼任。該部是731部隊的中樞部門，其任務是擬定{{細菌戰計劃，統管本部和各部的業務。它的權力很大，不僅負責整個部隊的文秘、人事、財務、計劃、後勤和勞工管理等工作，還負責與憲兵隊聯絡和接收供細菌試驗用的受試者。該部下設調查處、管理處、後勤處、人事處、會計處、計劃處，其中調查處下設翻譯班、印刷班、照相班、調查班、兵要地誌班、圖書室；{{}{}{}{}{{{後勤處下設勞務班、庶務班、酒吧、食堂、學校；管理處下設建設班、工務班、動力班、運輸班、電話班等。
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